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          上海研域生物常見(jiàn)細(xì)胞中的三大問(wèn)題是什么

          發(fā)布時(shí)間: 2024-05-15  點(diǎn)擊次數(shù): 1344次

          五月是綠的季節(jié)。一大片一大片的綠色正肆意地生長(zhǎng)著、壯大著。在金色的陽(yáng)光下,整個(gè)五月都被這耀眼的綠覆蓋了。心在不經(jīng)意間暢快了起來(lái)。柳樹(shù)在吐綠,樹(shù)叢在發(fā)新芽,這所有的綠,是五月變得活力四射。我司都會(huì)與您相約在一起哦!

          下面我公司為您詳細(xì)談?wù)?a target="_blank" style="text-decoration: underline; color: rgb(0, 0, 0);">常見(jiàn)細(xì)胞中常遇到的三大問(wèn)題:

          1、如何儲(chǔ)存和解凍常見(jiàn)細(xì)胞才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

          將常見(jiàn)細(xì)胞從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

          長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。

          我們建議細(xì)胞株應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

          2、常見(jiàn)細(xì)胞中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?

          沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。

          3、實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的常見(jiàn)細(xì)胞?

          國(guó)內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是比較好的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國(guó)外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來(lái)說(shuō)這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國(guó)產(chǎn)的就夠用了。此外,由于國(guó)內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒(méi)有生產(chǎn)線(xiàn),我們只能從代理商那里購(gòu)買(mǎi),而代理商又魚(yú)龍混雜,所以買(mǎi)到假貨的可能性也很大。所以,我們一般會(huì)從直銷(xiāo)員那里買(mǎi)血清,有的國(guó)外生物公司由于剛剛進(jìn)入中國(guó),度不高,但是其實(shí)在國(guó)外已經(jīng)做得很不錯(cuò)了,如GIBCO等,他們?cè)趪?guó)內(nèi)有辦事處,我們會(huì)從那里拿,血清的品質(zhì)和GIBCO不相上下,但價(jià)格相對(duì)優(yōu)惠很多。


          質(zhì)控常見(jiàn)細(xì)胞的制備:

          1、收集新鮮的無(wú)溶血、無(wú)黃疸、無(wú)細(xì)菌污染的陽(yáng)性血清。

          2、56℃加熱10小時(shí)來(lái)活。

          3、離心或過(guò)濾除去沉淀。

          4、用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將收集的血清稀釋至所需的濃度。

          5、抽濾除菌,按一次使用的量分裝小安瓿,封口,20℃保存?zhèn)溆茫豢煞磸?fù)凍融,被檢物要求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)選擇的水平。

          6、標(biāo)定含量,20-30次測(cè)定結(jié)果刪除>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值,并與已知定值血清對(duì)比測(cè)定。


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