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          ELISA常見問題和處理

          發布時間: 2016-06-06  點擊次數: 1761次

          問題  可能原因 解決方法
          1、無顏色  試劑孵育的時間沒有按說明書操作。  確定生物素化抗體,連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時間是否適當。
          2、不同試劑盒或不同批號的試劑混用。 重新檢查試劑的標簽,確準所有組分都屬于正使用的試劑盒中的。不能混用不同試劑盒或不同批號的試劑。
          3、漏加酶  檢查操作流程,注意不要漏加
          4、HRP酶污染了疊氮鈉  使用新配制的試劑,禁含疊氮鈉  標準品有問題(若在標本孔中有信號) 按說明書檢查標準品的制備使用1瓶新標準品    
          某一容器未洗凈,殘留滅活酶物質  
          盡可能用試劑盒內容器,另覓一定要潔凈、可靠使用含血清的緩沖液配制/復溶抗體 重新確認所選用的試劑    .
          漏加顯色劑A或B  
          加顯色劑后觀察一下液面高度    
          試劑配制/使用有誤  
          將實驗重做;嚴格按說明書操作,每次配制和使用前看清標簽。    
          緩沖液污染  
          配制新新鮮的緩沖液    
          顯色弱  
          超過有效期的產品可能會產生很弱的信號。
          檢查產品的有效期    
          加入試劑的體積和時間有誤
          確定所使用的每一個試劑的體積正確的和加入的時間是適當的。  
          試劑、樣品用前未能平衡  用前試劑、樣品置室溫平衡10分鐘左右   

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