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          ELISA試劑盒的回收率

          發布時間: 2013/7/30  點擊次數: 886次
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           elisa試劑盒 - ELISA簡介
          ELISA的基礎是 抗原或 抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。ELISA試劑盒結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其 免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
          然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。
          elisa試劑盒 - ELISA試劑盒的回收率
          elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數據為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為98%。
          對于定量檢測來說,主要還是一個準確度的驗證。不過我看到別人寫的內容比我自己想說的要好,所以就貼上去了。相對回收率可能會高于100%的,如果只是說“損失程度”,其實是不準確的。應該說,回收率越接近100%,說明這個試劑盒的準確度越高。
          elisa試劑盒 - Elisa的發展
          臨床測定技術的發展主要在于方法學的發展,而方法學的發展依托于試劑生產技術不斷進步更新和型標記物的應用。目前,分子生物學正在并zui終肯定會讓我們對整個生命科學有一個全面而*的認識,其對免疫測定技術發展的影響也是直接而又有效的,它使我們對以前一些難以檢測的 生物活性物質的測定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。
          elisa試劑盒 - ELISA試劑盒的制備方法
          包括以下步驟:
          1)抗原表位的計算機篩選;
          2)抗原的制備;
          3)血清的采集;
          4)間接ELISA方法的建立;
          5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證;
          6)試劑盒的穩定性驗證;
          7)對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩定性合格、重復性好。應用本發明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型肝炎病毒,適用于大批量發病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預防、控制豬戊肝病毒的流行和阻斷戊肝病毒由豬向人傳播。
          elisa試劑盒 - 基因工程試劑對免疫測定技術發展的影響
          ELISA試劑盒免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何的診斷試劑離不開的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的 單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發展,使用 基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。 
                   HBsAg試劑特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應性。酶表抗體為與HBsAg有不同結合位點的鼠復合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應用Parl Ehrich 學說(PEI)HBsAg標準品,對ad標準品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標準品靈敏度為0.025ng/ml
          elisa試劑盒 - 測試劑盒檢測原理
          ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是 中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入 孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP( 辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與*次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,ELISA試劑盒并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

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